일단 우리가 배양한 세포는

셀 공장오염되어 있어 대부분 취급이 어렵습니다.오염된 세포가 귀중하고 다시 얻기 어려운 경우에는 다음 방법을 사용하여 제거할 수 있습니다.

1. 항생제를 사용한다

항생제는 박테리아를 죽이는 데 더 효과적입니다.세포 공장.약물을 단독으로 사용하는 것보다 병용 약물을 사용하는 것이 더 효과적입니다.감염 후 약물 치료보다 예방 약물 치료가 더 효과적입니다.예방약은 일반적으로 이중 항생제(페니실린 100u/mL + 스트렙토마이신 100μg/mL)를 사용합니다.오염 후 세척 방법은 평소보다 5~10배 더 많이 해야 합니다.이 약은 첨가 후 24~48시간 동안 사용하고 그 후 평소의 루틴으로 교체해야 합니다.배양액.이 방법은 오염 초기 단계에 효과적일 수 있습니다.페니실린과 스트렙토마이신 외에도 사용되는 항생제에는 겐타마이신, 카나마이신, 폴리믹신, 테트라사이클린, 니스타틴 등이 포함될 수 있습니다. 일반적으로 사용되는 항생제는 400~800μg/mL 카나마이신 또는 200μg/mL 테트라사이클린입니다.배지는 2~3일마다 교체하며 1~2세대에 걸쳐 치료를 위해 전달됩니다.최근에는 4-플루오로, 2-하이드록시퀴놀린(Ciprofloxacin, Cip), 플루-로무틸린 유도체(Pleu-romutilin 파생물, BM-Cyclin2:BM-1 및 테트라사이클린 유도체(BM-2)) 등의 항생제가 보고되고 있다. 단독으로 또는 병용하여 사용하면 마이코플라스마를 죽이는 데 효과적입니다.이 세 가지 항생제는 모두 PBS의 250X 농축 용액으로 준비되고 나중에 사용하기 위해 -20°C에 보관됩니다.사용농도 Cip는 10μg/mL, BM-1은 10μg/mL, BM-2는 5μg/mL이다.사용시 오염된 배양액을 먼저 흡인하고, BM-1이 포함된 RPMI1640 배양액을 첨가한 후, 3일 후 배양액을 흡인하고, BM-2가 포함된 RPMI1640 배양액을 첨가하여 4일간 배양하는 식으로 연속 3일 동안 사용합니다. .33258형광염색현미경으로 마이코플라즈마가 제거된 것이 확인될 때까지 1회, 일반 배양배지를 첨가하여 배양하고 3~4회 계대한다.

2. 가열처리

오염된 조직 배양물을 41°C에서 18시간 동안 배양하면 마이코플라스마를 죽일 수 있지만 세포에는 부정적인 영향을 미칩니다.따라서 마이코플라스마를 최대한 사멸시키고 세포에 최소한의 영향을 미칠 수 있는 가열 시간을 탐색하기 위해 치료 전에 예비 테스트를 수행해야 합니다.이 방법은 때때로 신뢰할 수 없습니다.약으로 먼저 치료한 후 41°C로 가열하면 효과가 더 좋습니다.

3. 마이코플라스마 특이적 혈청을 사용하세요.

마이코플라스마 오염은 5% 토끼 마이코플라스마 면역혈청(혈구응집 역가 1:320 이상)으로 제거할 수 있습니다.특정 항체가 마이코플라스마의 성장을 억제할 수 있기 때문에 항혈청 치료 후 11일 후에 음성으로 변하고 5개월 후에도 음성으로 유지됩니다.부정적이다.그러나 이 방법은 항생제를 사용하는 것보다 더 번거롭고 편리하지도 경제적이지도 않습니다.

4. 기타 방법

위에서 언급한 오염제거 방법 외에도 동물에 접종 및 살균하는 방법, 대식세포 식균작용 방법, 오염된 물질에 브로모우라실을 첨가하는 방법 등이 있다.배양병그런 다음 빛을 조사하고 여과 방법 등을 조사하지만 모두 더 번거롭고 효과적이지 않습니다.따라서 마이코플라스마 오염이 발생하면 특별히 중요한 가치가 없는 한 일반적으로 폐기하고 다시 배양합니다.

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